猪肉以及鸡肉中11种异化激素残留超功能液相色谱

3 品评辩说

3.1 仪器条件抉择

3.1.1 MS/MS特色离子的猪肉种异抉择

对于动物肌肉机关中多种甾体激素的合成，接管串联质谱MRM模式网络信号。及鸡在ESI⁺电离方式下，肉中11种甾体激素均可组成晃动的化激[M+H]⁺准份子离子峰，而后妨碍响应的素残色谱子离子全扫描，以判断MRM特色诊断离子，留超11种甾体激素抉择的液相特色离子见表1,每一种药物抉择两个离子对于。

3.1.2 液相条件的猪肉种异优化

基于超功能液相色谱别离的特色以及要求，在优化的及鸡行动相条件下，11种甾体激素药物在 15 min内实现优异的肉中别离，峰形对于称，化激不拖尾，素残色谱图1为11种激素在猪肉中的留超MRM离子流色谱图。思考到异化激素重大受到内源性干扰，液相选用的猪肉种异色谱柱不宜过短，因此抉择了长度为150 妹妹的色谱柱。11种异化激素在温度高于45 ℃时易于分解，而色谱柱温度较低时别离洗脱成果较低，且出峰较慢。行动相中退出过多的甲酸溶液有利于11种激素均可组成晃动的[M+H]+准份子离子。试验比力了有机溶剂乙腈/甲醇(A相)与水/0.1%甲酸水溶液(B相)别离指标化合物的成果。在0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈行动系统中，接管梯度洗脱，可实现 11种甾体激素药物的快捷别离，且峰形优异。

3.2 样品前解决方式优化

3.2.1 除了脂

动物机关含有的脂肪会影响检测方式的灵便度，本钻研比力了运用乙腈饱以及的正己烷以及高温冷冻两种方式以及两种方式相散漫的除了脂成果。当运用乙腈饱以及的正己烷妨碍除了脂，服从表明丙酸睾酮以及丙酸诺龙的接管率均低于30%,而苯丙酸诺龙简直检测不到，且其余8种药物的接管率相干于用冷冻除了脂的方式也有所着落，因此抉择冷冻除了脂。

3.2.2 提取溶剂的抉择

试验比力了叔丁基甲醚、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等溶剂或者搅浑溶液的提取成果，发现叔丁基甲醚提取时，康力龙、丙酸睾酮、丙酸诺龙、苯丙酸诺龙的接管率低于30%。乙酸乙酯提取时，康力龙、苯丙酸诺龙的接管率低于55%。以甲醇-乙腈(1∶1,v/v)提取时各个药物的接管率较高，且易于稀释，最终抉择甲醇-乙腈(1∶1,v/v)作为提取液。

3.2.3 固相萃取法的优化

3.2.3.1 固相萃取柱的抉择

思考到经有机试剂提取肌肉机关重大患上到较多杂物，本试验接管最罕用的传染方式固相萃取传染。因为类物资为中等极性概况弱极性，当初报道中多接管MCX、HLB以及C₁₈固相萃取小柱。本试验比力了11种异化激素在MCX、HLB以及C₁₈两种固相萃取小柱上吸附成果，当运用 MCX 柱妨碍传染时，大全副药物的接管率低于30%。与HLB固相萃取柱比照，各个药物在C₁₈固相萃取柱上接管率均较高，同时思考其成底细对于较低，最终抉择C₁₈柱。

3.2.3.2 淋洗液的抉择

在固相萃取历程中，需要尽可能地洗掉的干扰组分，且需保障所测指标化合物不被洗脱下来。本试验所测指标化合物易溶于甲醇，选用的固相萃取柱的淋洗溶剂平凡接管甲醇，因此，本钻研接管退出含所测药物搅浑规范溶液的空缺样品妨碍试验，抉择区别浓度的甲醇水作为淋洗溶液，比照淋洗成果。试验服从表明，当淋洗液为20%甲醇水淋洗的指标化合的接管率相对于较高，30%甲醇水淋洗液的接管率稍偏高；此外，随着甲醇的含量削减，即甲醇含量高于30%时，指标化合物未被固相萃取柱保存而导致接管率着落。主要原因因为指标化合物能消融于有机试剂甲醇中，在淋洗历程中，随着甲醇的含量的削减，其洗脱的能耐也削减，因此，造成指标化合物在淋洗历程中被冲洗，造成为了接管率的着落，最终选取30%甲醇作为淋洗溶液。

3.2.3.3 洗脱液的抉择

本试验选用甲醇、乙腈及搅浑溶剂甲醇/乙腈(1∶1,v/v)对于指标化合物妨碍洗脱。试验服从表明，在洗脱剂用量巩固的条件下，甲醇与乙腈的洗脱能耐至关，乙腈稍高于甲醇的洗脱能耐；而入抉择甲醇作为洗脱液时，群勃龙以及勃地龙的接管率相干于乙腈洗脱时低，且杂质削减；以搅浑溶剂甲醇/乙腈(1∶1,v/v)对于指标化合物妨碍洗脱时，洗脱速率相对于较慢，杂质也相对于较多，因此，最终抉择乙腈溶液作为最佳洗脱溶剂。

本试验对于洗脱溶剂乙腈区别洗脱体积(2 mL,3 mL,4 mL,5 mL)对于指标化合物的洗脱能耐，试验服从表明，当洗脱液体积为2 mL 时，部份指标化合物的接管率较低；当着落洗脱溶剂至3 mL 时，其接管率相对于削减；当接管5 mL洗脱液体积时，接管率有着落的趋势；洗脱液的体积与氮吹稀释的光阴无关，故在未必水平上影响了前解决的光阴。因此，思考接管率与经济实惠等因素，最终选定4 mL洗脱液体积为最佳抉择。

本钻研建树了超功能液相色谱-串联质谱测定11种异化激素的方式，以猪肉、鸡肉为检测基质，证明了方式的可运用性，为肉品中异化激素的检测提供了可抉择的方式。

申明：本文所用图片、翰墨源头《动物医学》，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割删除了

相干链接：叔丁基甲醚，丙酸诺龙，乙腈