抗氧化剂的测定(二）

(二)分光光度法

一、抗氧道理

样品经由水蒸气蒸馏，化剂使BHT别离，测定用甲醇罗致，抗氧遇邻联二茴香胺与亚硝酸钠溶液天生橙红色，化剂用三氯甲烷提取，测定与规范比照定量。抗氧

二、化剂试剂

①无水氯化钙。测定

②甲醇。抗氧

③三氯甲烷。化剂

④亚硝酸钠溶液：3g/L，测定避光保存。抗氧

⑤联邻二茴香胺溶液：称取125mg邻联二茴香胺于50mL棕色容量瓶中，化剂加25mL甲醇，测定振摇使全副消融，加50mg活性炭，振摇5min，取20mL滤液，置于另一50mL棕色容量瓶中，加盐酸(1+11)至刻度。临历时现配并避光保存。

⑥BHT规范溶液：精确称取0.050gBHT，用大批甲醇消融，移入lOOmL棕色容量瓶中，并稀释至刻度，避光保存。此溶液每一毫升至关于0.50mgBHT。

⑦BHT规范运用液：临历时排汇1.0mL的BHT规范溶液，置于50mL棕色容量瓶中，用甲醇至刻度，混匀，避光保存。此溶液每一毫升至关于10.0μgBHT。

三、仪器

水蒸气蒸馏装置；甘油浴；分光光度计。

四、操作方式

(1)样品解决：称取2～5g样品(约含0.40mgBHT)于100mL蒸馏瓶中，加16g无水氯化钙粉末及10mL水，当甘油浴温度达到165℃恒温时，将蒸馏瓶浸入甘油浴中，衔接好水蒸气发生装置及冷凝管，冷凝管下端浸入盛有50mL甲醇的200mL容量瓶中，妨碍蒸馏，蒸馏速率每一分钟1.5～2mL，在50～60min内搜粗放lOOmL馏出液(连同原盛有的甲醇共约150mL，蒸气压不可过高，省患上油滴带出)，以温热的甲醇分次洗涤冷凝管，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度。

(2)测定：精确排汇25mL上述解决后的样品溶液，移入用黑纸(布)包扎的lOOmL分液漏斗中，另精确排汇0.OmL，1.0mL，2.OmL，3.OmL，4.0mL，5.OmL BHT规范运用液(至关于Oμg，10μg，20μg，30μg，40μg，50μgBHT)，分说置于黑纸(布)包扎的60mL分液漏斗，退出甲醇(50％)至25mL。分说退出5mL邻联二茴香胺溶液，混匀，再各加2mL亚硝酸钠溶液(3g/L)，振摇1min，部署10min，再各加lOmL三氯甲烷，猛烈振摇lmin静置3min后，将三氯甲烷层分入黑纸(布)包扎的10mL比色管中，管中预先放入2mL甲醇，混匀。用lcm比色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长520nm处测吸光度，绘制规范曲线比照。

参考资料：食物中有毒有害物资检测

相干链接：抗氧化剂，甲醇，亚硝酸钠，三氯甲烷