5种人造动物提取物中4种多环芳烃的HPLC—FLR测定方式（三）

三、种人造动中种样品前解决方式建树与优化

（1）空缺排查

空缺试样溶液在4种多环芳烃位置有指标峰泛起，物提是取物影响检测精确性的严主因素。本文对于试验中所用试剂、多环的用具及玻璃用具洗涤方式妨碍了系统排查与验证，芳烃方式服从表明：色谱纯试剂对于检测服从影响较小，测定合成纯试剂对于检测服从影响较大，种人造动中种清白水份比方过错检测服从产生影响；卓越尼龙0.22μm针式过滤器对于检测服从影响最小；过滤乙腈时，物提塑料注射器对于检测服从的取物影响小于玻璃注射器；玻璃用具用色谱隧道己烷、色谱纯甲醇挨次分说洗涤一遍后可能知足检测需要。多环的

（2）万寿菊提取物前解决方式建树与优化

接管GPC行动相超声提取万寿菊提取物中多环芳烃，芳烃方式样品散漫度差，测定无益于多环芳烃的种人造动中种提取，为使样品在提取历程中处于消融或者散漫状态，物提本文验证了丙酮、取物二氯甲烷、DMF、50％丙酮二氯甲烷、乙醇作为匆匆溶溶剂时4种多环芳烃的别离成果。服从表明：丙酮作为匆匆溶溶剂时，万寿菊提取物在GPC行动相中散漫度优异，4种多环芳烃别离度高。因此抉择丙酮作为万寿菊提取物前解决的匆匆溶溶剂。

（3）番茄提取物前解决方式建树与优化

接管GPC行动相超声提取番茄提取物中多环芳烃，样品散漫度以及4种多环芳烃别离度优异，但加标接管率低于60％。依据番茄提取物性子，在前解决历程中退出二氯甲烷作为匆匆溶溶剂，履历证样品散漫度以及4种多环芳烃别离度优异，4种多环芳烃加标接管率在65％～100％之间。因此抉择二氯甲烷作为番茄提取物前解决的匆匆溶溶剂。

（4）葡萄籽提取物以及绿咖啡豆提取物前解决方式建树与优化

参考相干国标以及文献，分说验证了正己烷萃取，50％丙酮二氯甲烷萃取，水溶液萃取正己烷反萃取的液液萃取、甲醇水溶液萃取正己烷反萃取的液液萃取以及乙醇水溶液萃取正己烷反萃取的液液萃取，区别萃取溶剂以及萃取方式下的萃取成果。服从表明，乙醇水溶液萃取正己烷反萃取的液液萃取方式，4种多环芳烃别离度优异，加标接管率在65％～107％之间。因此抉择乙醇水溶液萃取正己烷反萃取的液液萃取方式作为葡萄籽提取物以及绿咖啡豆提取物的前解决方式。

（5）姜黄提取物前解决方式建树与优化

接管GPC行动相超声提取姜黄提取物中多环芳烃，样品加标接管率低，且传染凝胶浸透色谱柱；接管丙酮超声提取姜黄提取物中多环芳烃，样品残缺消融，杂质多，且加标接管率低；接管丙酮超声提取姜黄提取物中多环芳烃，萃取液经多环芳烃固相萃取柱传染，4种多环芳烃别离度优异，加标接管率在75％～85％之间。因此抉择丙酮超声萃取、固相萃取柱传染的方式作为姜黄提取物的前解决方式。

四、精确度验证

分说在万寿菊提取物、番茄提取物、葡萄籽提取物、绿咖啡豆提取物以及姜黄提取物样品中削减二、五、10μg／kg  3个水平规范使命溶液，每一个削减浓度水平妨碍6个重复测定。

用万寿菊提取物精确称取0.19万寿菊提取物样品(精确至0.00019)于25mL容量瓶中，用玻璃移液管退出2mL色谱纯丙酮匆匆溶，涡旋使其搅浑平均后，退出GPC行动相定容，摇晃搅浑平均，超声消融。运用玻璃注射器，用0.22um滤膜过滤至GPC进样管中，经GPC传染。

收集液运用旋转蒸发仪稀释至近干，氮气吹干，用2mL 88％乙腈水溶液精判断容，超声消融，样品液运用一次性注射器过0.22μm滤膜，装小瓶进样检测。

用番茄提取物，精确称取0.2～0.39番茄提取物样品(精确至0.00019)于25mL具塞玻璃试管中，用玻璃移液管退出2mL色谱纯二氯甲烷匆匆溶，涡旋使其搅浑平均后，退出GPC行动相定容，摇晃搅浑平均，在40℃以上的超声波洗涤机中超声提取30min。在3500r／min、5℃条件下离心5min。运用玻璃注射器，用0.22μm滤膜过滤至GPC进样管中，经GPC传染。收集液运用旋转蒸发仪稀释至尽干，氮气吹干，用2mL 88％乙腈水溶液精判断容，超声消融，样品液运用一次性注射器过0.22μm滤膜，装小瓶进样检测。

用葡萄籽提取物以及绿咖啡豆提取物。精确称取0.3～0.59样品(精确至0.00019)于10mL试管中，挨次退出3mL超纯水以及0.5mL色谱纯乙醇溶液，涡旋、超声使其消融，再退出2mL色谱隧道己烷，涡旋混匀。在4000r／min、15℃条件下离心5min。绿咖啡豆提取物用移液枪将下层正己烷转移至圆底烧瓶中，葡萄籽提取物用60℃～80℃水浴加热溶液，使正己烷层消融，再用移液枪将下层正己烷转移至圆底烧瓶中，用正己烷重复萃取1次，并吞正己烷溶液。氮气将正己烷吹干，用2mL88％乙腈水溶液精判断容，超声消融，样品液运用一次性注射器过0.22μm滤膜，装小瓶进样检测。

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