红曲霉液态发酵产色素及晃动性的钻研（一）

随着人们瘦弱意见的红曲增强，人造色素越来越受广漠斲丧者的霉液兴致，特意是酵产及晃由红曲霉分解的红曲色素，具备调节血压、色素抗突变、动性的钻抑菌等活性，红曲是霉液一类牢靠、无毒的酵产及晃人造食用色素。红曲色素在肉废品、色素面包废品、动性的钻豆腐乳废品、红曲酿酒行业等食物制作中都患上到了宽泛的霉液运用。

当初，酵产及晃红曲色素的色素发酵斲丧方式主要有固态发酵以及液态发酵，其中因为液态发酵具备发酵周期短、动性的钻不易染菌等短处，近些年来深受人们的关注。付荣霞等从区别碳源、氮源、pH、装液量等方面临红曲霉产红曲色素的液态发酵条件妨碍了钻研，服从表明：其最佳的发酵工艺条件因此3%玉米粉为碳源，0.02%酵母膏为氮源，pH为4.0，装液量为125mL/250mL，此时红曲色素的总色价可达93.66U/mL。王艳等患上到红曲霉产红曲色素的最佳工艺条件为：葡萄糖60g/L、卵白胨26g/L、FeSO40.9g/L、L-谷氨酸2g/L以及初始pH4.5。在此优化条件下，红曲色素色价为105.22U/mL，比优化前(33.62U/mL)普及了3.13倍。为了更好地开辟运用红曲色素，本文不光从装液量、光阴、接种量、金属离子及维生素削减量等方面临红曲霉发酵产红曲色素的工艺条件妨碍了钻研，还从pH、光照、削减剂等方面钻研了红曲色素的晃动性，为红曲色素的斲丧及在食物行业中的进一步开辟运用提供了参考。

一、资料与方式

一、资料与仪器

红曲霉(Monascusrubber)：保存于福建师范大学福清分校生物工程试验室；蔗糖、卵白胨、葡萄糖、硫酸镁、磷酸氢二钾、硫酸锰、硫酸锌等试剂：均为合成纯，购自国药总体化学试剂有限公司；试管斜面作育基：马铃薯葡萄糖琼脂作育基(PDA作育基)；种子作育基(g/L)：蔗糖30、卵白胨30、KH2PO40.五、MgSO40.五、pH5.5～6.0；发酵作育基(g/L)：葡萄糖40、卵白胨30、KH2PO42.0、MgSO41.0、硝酸钠0.一、pH6.0。

SPX-150B-Z生化作育箱，福州精科仪器仪表有限公司；722SP分光光度计，上海棱光技术有限公司；TG16-WS高速台式离神思，上海湘仪有限公司；BS224S电子天平，赛多利斯仪器系统有限公司；FA2204B电子合终日平，上海越平迷信仪器有限公司；T.HZ-C台式恒温振荡器，太仓市华丽生化仪器厂；NRY-2102C恒温作育震撼器，南荣试验室配置装备部署有限公司；DKS-24数显恒温水浴锅，上海详尽试验配置装备部署有限公司；CDZX-50KB立式压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗工具厂；SW-CJ-2FD超净使命台，福州伍联医疗工具备限公司。

二、试验方式

（1）红曲霉的活化及种子液的制备

挑取4℃冰箱保存的红曲霉划线接种于试管斜面，30℃活化作育5d；挑取活化后的红曲霉接至装有100mL种子作育基的250mL三角瓶中，30℃、180r/min振荡作育3d。

（2）红曲霉液态发酵优化的单因素试验

将作育好的种子液按区别接种量接至区别装液量，削减区别金属离子浓度及区别维生素浓度的发酵作育基中(削减有数粒玻璃珠)，30℃、180r/min振荡作育确守光阴后，发酵液在8000r/min离心5min，分说收集上清液以及菌丝积淀，测定上清液的红曲色素。装液量梯度为25，50，75，100，125，150mL/250mL三角瓶；接种量梯度为1%、3%、5%、7%、9%、11%；作育光阴梯度为1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11d；金属离子(硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸铁)削减量梯度为0，0.025，0.05，0.075，0.100，0.125，0.150妹妹ol/L；维生素(维生素B一、维生素B三、维生素B五、叶酸、维生素H)削减量梯度为0.01%、0.03%、0.05%、0.07%、0.09%。

（3）红曲霉液态发酵优化的正交妄想试验

依据单因素试验服从，接管五因素三水平对于红曲霉液态发酵妨碍正交试验妄想，其因素以及水平见表1。

（4）发酵液中红曲色素色价的测定

红曲红色素色价的测定接管GB15961-2005《食物削减剂红曲红》。

式中：E^1%_1cm(495±10)nm为试样的色价；A为稀释后试样溶液的吸光度；V为试样的体积，mL；n为稀释倍数。

(5)红曲色素的晃动性钻研

①温度对于红曲色素晃动性的影响

取10mL发酵上清液于25mL具塞试管中，分说置于20，40，60，80，100℃水浴中，每一隔0.5h测定色价。

②光照对于红曲色素晃动性的影响

取10mL发酵上清液于25mL具塞试管中，分说在18W日光、人造光、避光下部署，每一隔12h取样测定色价。

③pH对于红曲色素晃动性的影响

取10mL发酵上清液于25mL具塞试管中，用0.1mol/L盐酸或者0.1mol/L氢氧化钠将pH调至1，3，5，7，9，11，室温下部署确守光阴，每一隔2h取样测定色价。

④氧化剂、复原剂及削减剂对于红曲色素晃动性的影响

取10mL发酵上清液于25mL具塞试管中，分说削减维生素C、双氧水、苯甲酸钠、乙二胺四乙酸(EDTA)及亚硝酸钠等，使其终浓度为100mg/L。摇匀后，避光保存，每一隔2h取样测定色价。

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