HPLC法测定兰州拉面汤中核苷类成份含量的钻研（一）

来源：头一无二网编辑：综合时间：2024-10-17 20:24:07

兰州拉面又叫兰州清汤牛肉面，法测2007年《兰州市第一批非物资文化遗产呵护名录》中，定兰的钻把兰州清汤牛肉拉面制作本领，州拉中核作为非物资文化遗产妨碍呵护，面汤这是苷类对于拉面艺术的一种未必。无关拉面的成份记实，最先见于明代，含量先把面煮好捞出，法测浇上煮好的定兰的钻汤，再放上辣椒油、州拉中核蒜苗即成，面汤不光色、苷类香、成份味、含量形俱全，法测而且食用不便快捷。它选料挑剔、做工详尽，中间技术在“汤”，制汤选用牛腿骨、精牛肉、牛肝，调味料有姜、草果、桂皮、丁香、花椒、山柰、精盐，调味料中的草果需砸开，同桂皮、丁香、花椒、山奈等一起熬煮。兰州拉面汤营养充实，滋味鲜美，个别在吃完面条日后，还要逐步品味面汤。兰州拉面汤不能长期熬煮，以保障汤的鲜美滋味，因此，拉面馆只在破晓至三更的光阴凋谢。

核苷是核酸分解的前体，它是所有性命系统中操作愿望发育以及新陈代谢的根基。食源性核苷以及核苷酸类物资可调节机体免疫功能，抗菌抗病毒，有利于小肠的愿望发育及抑制细菌的散漫孳生、增强脂质代谢以及肝脏功能等、对于肝脏、血汗管及神经系统的疾病也有治疗浸染。核苷类化合物还可能经由嘌呤以及/或者嘧啶受体起到调控机体种种心理历程的浸染。

当初，对于兰州拉面的钻研较少，除了经济学方面的钻研如市场营销、经营打点外，主若是对于兰州拉面中面条的品质妨碍钻研，孔雁等钻研了面粉品质对于兰州拉面光华的影响，张影全等钻研了小麦籽粒品质性状对于兰州拉面感官品质的影响，李志博等钻研了面粉理化品质性状与兰州拉面品质的关连，李岩介绍了拉面剂对于兰州拉面的浸染机理及牢靠性。但对于兰州拉面汤的钻研很少，仅有少数对于兰州拉面营养成份的钻研，对于兰州拉面汤中核苷类成份的钻研尚未见报道。本文拟接管功能液相色谱法对于区别品牌兰州拉面汤在食用历程中核苷类物资含量妨碍钻研，为兰州拉面作为兰州特色食物提供试验依据。

1 资料与方式

1.1 主要资料与试剂

试剂：比力品次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷，HLPC纯度均≥98％(北京索莱宝科技有限公司)，甲醇、乙腈(色谱纯，默克化工技术(上海)有限公司)。

资料：选取兰州市区别品牌的兰州拉面馆6家，取新熬制的兰州拉面汤。

1.2 主要仪器与配置装备部署

Ultimate3000功能液相色谱系统：配有可变波长紫外检测器以及Chromeleon7色谱使命站：美国Themo公司lTLE204E电子天平：梅特勒托利多公司lCP225D型合终日平：德国Sanorius公司lKQ一300DV型超声波洗涤器：江苏昆山市超声仪器有限公司；Milli—Q纯水仪：密理博公司。

1.3 试验条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：Acclail^TM120C₁₈色谱柱(250妹妹×4.6妹妹，5μm)I行动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～3min，2％B；3～3.1min，2％B～3％B；3.1～6min，3％B；6.0～6.1min，3％B～4％B；6.1～9min；4％B～7％B；9.1—17min，7％B；17.1～20min，2％B)；流速1.0mL/minl检测波长260nm；柱温30℃；进样量5μL。

1.3.2 规范品溶液的制备

详尽称取次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、尿苷、腺苷比力品各8mg，将次黄嘌呤用2％盐酸一水溶液消融，将黄嘌呤用5％氨水消融，其余比力品用20％甲醇-水溶液消融，分说定容于10mL容量瓶中，分说取各比力品溶液1.0mL于对于立10mL容量瓶中，定容至刻度，配制成80μg/mL的搅浑比力品蕴藏液。将蕴藏液配制成浓度分说为lμg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的使命液，即患上。

1.3.3 样品溶液的制备

取6种新熬制的兰州拉面汤，编号分说为l号、2号、3号、4号、5号、6号，对于每一个样品分说妨碍Oh、1.5h、3h、4.5h以及6h的熬煮，熬煮历程中在汤中逐步退出大批水，保障熬煮历程中汤的浓度巩固，将兰州拉面汤经0.22μm滤膜过滤，待上机测定。

2 服从与合成

2.1 色谱条件的抉择

2.1.1 检测波长的抉择

将浓度为80μg/mL的6种核苷比力品在分光光度计上全波段扫描(波长畛域为190nm～1100nm)，除了鸟苷罗致峰在254nm左近外，其余5种核苷类物资在紫外区均有两个罗致峰，次黄嘌呤罗致峰在250nm以及l95nm，黄嘌呤在268m以及196nm左近，肌苷在249nm以及197nm左近，尿苷在263nm以及205nm左近，腺苷在260nm以及206nm左近。参考王光亚的检测方式，综合思考，判断上述物资的别离波长为260nmn。

2.1.2 行动相的抉择

抉择甲醇-水，乙腈-水为行动相，分说妨碍等度洗脱以及梯度洗脱试验，服从为甲醇-水以及乙腈-水等度洗脱、甲醇-水梯度洗脱均不能将6种物资残缺别离，以乙腈-水作为行动相，流速为lmL/min，柱温30℃，经由重复试验，患上卓越谱柱：Acclail^TM120C₁₈色谱柱(250妹妹×4.6妹妹，5μm)I行动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～3min，2％B；3～3.1min，2％B～3％B；3.1～6min，3％B；6.0～6.1min，3％B～4％B；6.1～9min；4％B～7％B；9.1～17min，7％B；17.1～20min，2％B)；流速1.0mL/minl检测波长260nm；柱温30℃；进样量5μL的色谱条件，可能将6种核苷类物资较好的妨碍别离。