超功能液相色谱一串联质谱法同时测定焙烤食物中9种水溶性削减剂的钻研（一）

食物削减剂主若是超功测定指在食物斲丧历程中，为了实用改善食物的相色性削色、香、谱串谱法味以及食物自身的联质品质，同时还为了防御食物侵蚀，焙烤实用对于食物妨碍保鲜及深加工而在食物中削减家养分解的食物水溶物资概况人造物资。当初，中种在中国全部焙烤食物行业的减剂斲丧历程中，可能说食物削减剂是超功测定到处可见的，也都发挥着各自实际的相色性削浸染与价格，实用普及了焙烤食物的谱串谱法品质，保存了食物的联质营养。近多少年，焙烤随着公共瘦弱意见的食物水溶普及，对于防腐剂、中种甜味剂以及着色剂等食物削减剂滥用成果在媒体上品评辩说患上越来越多。事实上，天下各地焙烤食物牢靠危害监测服从也呈现，漂白剂、防腐剂、膨松剂及甜味剂等多少类罕用食物削减剂的滥用状态较为突出。

当初，已经有检测甜味剂以及色素类物资的规范，测定方式主要有离子色谱法（IC）、功能液相色谱法（HPIC）以及液相色谱一串联质谱法（IC—MS/MS）等，其中HPLC法较为罕用，但因为受到紫外检测器灵便度的限度，苦涩素等缺少强紫外罗致基团的指标组分可能因含量较低而无奈检出，而且该方式不能提供指标化合物的化学结构信息，在实际样品合成时重大受到基质干扰而产生假阴性征兆。又种种焙烤食物的基质重大，成份较多，重大对于多少种甜味剂的出峰以及检测造成较大的干扰，造成假阴性或者假阴性等误判的征兆。同时对于食物中多组分削减剂合成，不可防御会碰着如下成果：（1）因为色谱的分说能耐有限，当样品中组分过多时，色谱伎俩很难将所有的组分说离；（2）对于相邻的色谱峰，当保存光阴相近时，仅靠保存光阴对于组分定性不精确以及短缺；（3）对于重大基质的样品，基质的干扰仅靠紫外检测器很难妨碍翦灭。本试验散漫HPLC别离能耐强，合成速率快，质谱检测器（MS）定性精确、抉择性以及灵便度高的特色，能在较短的光阴内对于多组分妨碍一次性的别离以及判断，经由梯度洗脱，运用电喷雾电离负模式，接管超功能液相色谱一串联质谱法建树一种可同时测定并可能快捷、精判断性焙烤食物中9中水溶性削减剂的方式。

一、试验全副

一、资料与试剂

亮蓝、日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红以及蛊惑红规范溶液（0.5mg/mL，中国计量迷信钻研院）；糖精钠、安赛蜜、苦涩素（纯度均大于即是98％l德国Dr．Ehrensorfer）。

乙腈、正己烷（色谱纯）、乙酸铵（合成纯）。

二、仪器与配置装备部署

ABSciexTnpleQuad5500质谱仪，配有电喷雾ESI源（ABSciex），Analyst使命站；ST一40离神思（Tllemo）lVORlEX一3涡旋振荡器（IKA）；超纯水系统（Millip0IreMilli—Q）。

三、方式

（1）规范溶液配制

精确称取糖精钠、安赛蜜、苦涩素规范物资约10.0mg，于各自的10mL容量瓶中，用水消融并定容至刻度，配成1.0mg/mL的规范蕴藏液，置于4℃冰箱中保存。

搅浑规范使命液：分说精确排汇过多上述准蕴藏液配成亮蓝、日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、蛊惑红以及糖精钠浓度为10mg/L及安赛蜜、苦涩素浓度为1mg/L搅浑规范使命液。

（2）色谱条件

色谱柱：watersAtlantisT3（3μm，2.1妹妹*150妹妹）I行动相：乙腈（A）一20妹妹ol/L乙酸铵溶液（B）；梯度洗脱条件：0～0.5min，5％A；0.5～3min，5％～50％A；3～5min，50％A；5～7min，50％～90％A；7～7.1min，90％～5％A；7.1～10min，5％A。流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL。

（3）质谱条件

电喷雾离子源（ESI）：负离子模式网络；喷雾电压：一4500V（ESI一）；离子源温度（TEM）：600℃；气帘气（CUR）流速：35L/mim碰撞气（CAD）流速：7LA/min；锥孔气流速（Gasl）：30L/min；去溶气（Gas2）流速：30L/min；扫描模式：抉择反映监测（SRM）；其余条件见表1。

（4）样品解决

精确称取2g（精确至0.01g）样品于50mL离心管中，退出20mL20％乙腈1％氨水溶液，涡旋搅浑1min，于50℃水浴超声20min提取，加正己烷10mL，涡旋搅浑1min，而后于4500r/min离心5min，弃去有机相，取2mL水相转移至离心管中，10000r/min离心5min，清液过0.22μm有机相滤膜，供上机测定。

二、服从与合成

一、行动相的优化

本方式对于行动相的种类妨碍了审核。比照了甲醇一甲酸乙酸铵水、乙腈一甲酸乙酸铵水、甲醇一乙酸铵、乙腈一乙酸铵作为行动相时各化合物的别离状态。服从发现：甲醇系统以及乙腈系统比照拟，乙腈系统别离成果更好；行动相中退出甲酸后对于色素的峰形以及保存光阴影响较大，有些峰割裂；行动相中退出乙酸铵后色谱峰峰形患上到清晰改善；并对于乙酸铵的浓度妨碍了进一步骤查，服从表明行动相中乙酸铵浓度为20妹妹o/L时少数化合物色谱峰响应值较高，峰形锋利，最终抉择乙腈一20妹妹01/L乙酸铵作为行动相妨碍梯度洗脱。搅浑规范离子流图详见图1。

二、质谱条件的优化

本试验在EsI模式下，配制适量浓度的待测物经由针泵间接陆续进样，依据待测物的化学性子，在负电离模式下优化待测物的母离子以及特色子离子以及响应的DP、CE等质谱参数。经由质谱条件优化，3种甜味剂的准份子离子峰以及电离方式为：安赛蜜脱氢（M—H），m/z162；糖精钠脱钠（M—Na），m/z182；苦涩素脱钠（M—Na），m/z178；6种色素的电离方式为：亮蓝、日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、蛊惑红等均为[M—nNa+（n一2）H］型电离，m/z挨次为373.2，202.8，225，233.1，268，268；优化后的质谱参数见表1。

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