超声波辅助提取会理石榴皮中总黄酮的工艺钻研（一）

石榴（Punicagranatum）属石榴科动物，超声是波辅中国的特色果品，因适应性强、助提中总好打点，理石榴皮在我国中部、黄酮东部、艺钻研西部区域均有种植。超声石榴皮中含有良多具备营养价格以及药物价格的波辅实用成份，如心理活性十分宽泛的助提中总黄酮类化合物、多元酚类化合物鞣质、理石榴皮生物碱类有机化合物以及一些酸性有机化合物的黄酮多种实用成份。黄酮类化合物的艺钻研心理活性十分宽泛，具备抑菌、超声抗炎、波辅降血压等多种在医学上十分紧张的助提中总功能，特意是具备抗从容基、抗癌、防癌的浸染，使患上黄酮类化合物在医学、保健食物、人造食物削减剂，特意是人造的抗氧化剂的钻研以及运用上有着十分紧张的位置。近些年来，黄酮的需要量越来越大，差此外学者从良多规范的原资料上提取黄酮类化合物，可是已经钻研与开辟的黄酮类产物仍属少少数。黄酮类产物具备十分大的市场需要空间。超声提取技术主若是运用超声波的空化浸染减速动物细胞中实用成份的溶出，超声波提取具备省时、节能、提取率低等短处，在工业斲丧上曾经有比照宽泛的运用。

四川的攀西会理区域，具备十分充实的石榴资源，当地特意的南亚天气使该区域的石榴不够为奇。在对于石榴妨碍加工的同时，会留下少许的石榴皮。随着会理石榴销售量的日益削减，石榴副产物也在日益削减。这些遗留下来的石榴皮不光造成为了重大的资源浪费，而且给情景带来严正劫持。本试验以四川会理石榴皮作为钻研资料，接管超声波辅助提取工艺，钻研石榴皮中总黄酮的最佳提取工艺，以期为四川攀西区域石榴皮的广博加工提供事实依据。

二、资料与方式

一、资料与试剂

试验所用石榴采自四川会理。芦丁化学比力品（规范品，成都瑞芬思生物科技有限公司）；亚硝酸钠（合成纯，成都市科龙化工试剂厂）；硝酸铝（合成纯，科龙化工试剂厂）；氢氧化钠（合成纯，成都市科龙化工试剂厂）。

二、仪器

电热恒温鼓风去世板箱（上海跃进医疗工具备限公司）；万分之一电子天平；XL-10B500克密封型摇晃式破碎捣毁机（广州市旭朗机械配置装备部署有限公司）；KH3200V型超声波洗涤器（昆山禾创超声仪器有限公司）；TDL-6A离神思（上海菲恰尔合成仪器有限公司）；L2S可见光分光光度计（上海仪电合成仪器有限公司）。

三、试验资料的解决

将会理石榴手工剥皮，将皮切碎成小颗粒（约0.5×0.5×0.5cm巨细），置于红色磁盘中摊平，放入70℃的恒温鼓风去世板箱中去世板至全干。用超微破碎捣毁机将石榴皮破碎捣毁，过60目筛，将石榴皮细粉末装入不透光的密封样品袋中，寄存在去世板器中待用。

四、规范曲线的绘制

精确称取芦丁化学比力品20mg，用浓度为30%的乙醇溶液将其消融、定容于50mL容量瓶中，短缺摇匀，最终患上到浓度为0.4mg/mL的芦丁规范溶液，避光保存待用。

精确排汇上述配置装备部署好的芦丁规范溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分说置于10mL试管中，分说退出30%乙醇至5mL，编号为一、二、三、四、五、6。再各退出5%的NaNO₂溶液0.3mL，混匀，无色调变换，静置6min，而后分说退出0.3mL10%的Al（NO₃）₃溶液，摇匀，静置6min。再分说退出4%的NaOH溶液1mL，摇匀，色调加深，最后用30%乙醇溶液稀释至刻度，静置20～25min，并于30min后在芦丁的最大罗致峰510nm处测定光密度值。

五、黄酮类化合物的提取方式

精确称取过筛后的会理石榴皮粉0.5000g于25mL比色管中，退出未必浓度的乙醇提取液，摇匀，密封。在未必温度下（且需连结此温度）妨碍超声波提取一段光阴后掏出。将超声解决后的样品静置冷却至室温，而后妨碍过滤，取滤液2mL于25mL比色管中，退出对于应乙醇溶液至10mL，退出5%NaNO2溶液0.6mL，摇匀后静置6min，而后分说退出0.6mL的10%的Al（NO3）3溶液，摇匀后静置6min后退出4%的NaOH溶液2mL，摇匀后用对于应乙醇溶液稀释至20mL，静置20～25min后，以5000r/min的速率离心8min后在510nm下测定其吸光值，以对于应乙醇溶液作为空缺比力。

六、提取率的合计方式

依据规范曲线，患上出芦丁含量，按下式求出样品中的黄酮含量。

式中：X—样品总黄酮提取率；

m₁—被测溶液的总黄酮含量，mg；

m—试样的品质，g；

v₁—待测液分取的体积，mL；

v₂—待测液的总体积，mL；

注：服从精确至小数点后2位。

二、服从与合成

一、规范曲线

按精确称取芦丁化学比力品20mg，用浓度为30%的乙醇溶液将其消融、定容于50mL容量瓶中，短缺摇匀，最终患上到浓度为0.4mg/mL的芦丁规范溶液，避光保存待用。遵照这个的方式，绘制芦丁规范曲线如图1。运用最小二乘法经线性回归，求出芦丁浓度与吸光度值关连曲线的回归方程y=0.1194x-0.0005，R²=0.9995，诠释芦丁在此畛域内具备优异的线性关连。

二、区别乙醇浓度对于石榴皮总黄酮提取率的影响
 

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