低压抑备纽莫康定B0的中试钻研（一）

纽莫康定B₀(Pneumocandin B₀)是低压棘白菌素类化合物，其半分解衍生物卡泊芬净(Caspofungin)已经被美国食物药品监督打点局(FDA)批准用于治疗实用或者无奈耐受其余抗真菌药的抑备患者的侵袭性曲霉病。作为分解真菌药物卡泊芬净的纽莫中间体，纽莫康定B₀由真菌Zalerion arboricola发酵产生，康定发酵历程中会产生与纽莫康定B₀结构相近的中试钻研副产物及少许的色素。遵照结构中脯氨酸上取代基的低压区别主要分为A₀，B₀以及C₀，抑备其中B₀，纽莫C₀分说为同分异构体。康定因为C₀为B₀斲丧历程中的中试钻研紧张杂质，在斲丧纯化历程中去除了C₀有未必的低压难度。因此，抑备开收回一种实用的纽莫方式患上到高纯度的纽莫康定B₀对于后续分解卡泊芬净尤为紧张。

色谱别离法在化合物的康定别离中运用较为宽泛，且色谱纯度、中试钻研接管率以及别离功能等方面远远优于传统的制备方式，其中色谱纯度经由面积归一化法患上到。比照于中低压色谱制备，低压色谱制备功能高、柱效高。笔者以试验室制患上的纽莫康定B₀粗品为质料，经由低压抑备对于纽莫康定B₀妨碍了放大中试钻研，开收回了一莳斲丧周期短、老本低以及色谱纯度高的制备工艺。

1 仪器与试药

1.1 仪 器

U3000功能液相色谱仪，赛默飞Thermo公司；Cs-prep150工业制备色谱系统，汉邦科技；R-1001N型旋转蒸发仪，郑州长城科工贸有限公司；SHB-B95型循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；DHJK-2020高温冷却循环泵，郑州科泰试验配置装备部署有限公司；SCIENTZ-12ND冷冻去世板机，宁波新芝生物科技股份有限公司。

1.2 试 药

工业级二氯甲烷，山东金岭化工股份有限公司；工业甲醇，兖矿国宏化工有限责任公司；改性硅胶，苏州纳微科技股份有限公司；纽莫康定B₀粗品，鲁南新时期生物技术有限公司提供，品质分数81.20%;纽莫康定B₀比力品，大同市矿区风华生物科技有限公司，品质分数95.56%，批号16001;纽莫康定C₀比力品，大同市矿区风华生物科技有限公司赠与，品质分数95.11%，批号16002;乙腈为色谱纯，其余试剂均为合成纯，水为纯化水。

2 实 验

2.1 HPLC(功能液相色谱)法测定B₀

纽莫康定B₀检测方式：Thermo Hypersil GOLD C18，4.6 妹妹×250 妹妹， 5 μm; 以V(乙腈)∶V(水)=45∶55为行动相，等度洗脱；检测波长210 nm， 柱温40 ℃，进样量10 μL，流量1 mL/min， 运行光阴45 min。以纽莫康定B₀比力品妨碍外标法定量。纽莫康定B₀比力品溶液的配制：取纽莫康定B₀比力品约20 mg， 详尽称定，置于50 mL容量瓶中，加乙醇超声消融后，稀释至刻度，摇匀，制患上品质浓度为400 mg/L的纽莫康定B₀比力品溶液。供试品溶液配制：对于制备液用氮气吹干，加乙醇振摇使消融并稀释至品质浓度约1 000 mg/L，摇匀，用0.22 μm有机滤头过滤。纽莫康定B₀的结构式为

2.2 HPLC(功能液相色谱)法测定C₀

检测方式为公司自行开辟，线性梯度洗脱挨次如表1所示。Welch Ultimate HILIC Amide柱，4.6 妹妹×250 妹妹， 3.5 μm; 波长220 nm， 流量1.0 mL/min， 进样量10 μL，柱温40 ℃，行动相A为水，行动相B为乙腈。

以纽莫康定C₀比力品妨碍外标法定量，纽莫康定C₀比力品溶液的配制与纽莫康定B₀比力品溶液的配制相同。纽莫康定C₀的结构式为

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