响应面法优化白芷挥发油提取工艺及其抗氧化活性钻研（一）

白芷为伞形科动物白芷Angelicadahurica（Fisch.exHoffm.）Benth.etHook.f.或者杭白芷Angelicadahurica（Fisch.exHoffm.）Benth.etHook.f.var.formosana（Boiss.）ShanetYuan的面法去世板根。白芷中含有香豆素类、优化油提艺及氧化挥发油、白芷多糖类、挥发活性黄酮类等多种实用成份，取工其抗具备解表散寒、钻研祛风止痛、面法宣通鼻窍、优化油提艺及氧化燥湿止带、白芷消肿排脓的挥发活性成果。今世钻研表明，取工其抗其具备抑制玄色素、钻研抗氧化、面法镇痛、优化油提艺及氧化抗炎、白芷抗过敏等药理浸染，在临床运用宽泛。白芷具备抑制玄色素的浸染以及抗氧化浸染，可作为美白化装品的质料。因为白芷无毒且香气浓郁，也常作为肉类制作的调味品，可作废牛羊肉的膻味。挥发油作为白芷的实用成份之一，是其作为药品以及调味品的紧张活性成份。

提取挥发油的平凡方式有压迫法、溶剂提取法、水蒸气蒸馏法以及超临界CO2萃取法等。思考到药品以及食物的牢靠性以及操作的可行性，在前期钻研的根基上，白芷挥发油的提取选用水蒸气蒸馏法，该法操作啰嗦、溶剂牢靠易患，并接管Box-Behnken妄想响应面法优选白芷挥发油的提取工艺，克制了正交试验精度不够的弱点。同时，经由体外抗氧化试验测定白芷挥发油对于羟从容基翦灭率以及DPPH从容基翦灭率，审核其体外抗氧化能耐，为白芷产物的综合开辟提供参考依据。

1 资料与方式

1.1 资料与试剂

白芷（购于北京同仁堂药店），其产地为四川，经判断为白芷为伞形科动物白芷Angelicadahurica（Fisch.exHoffm.）Benth.etHook.f的去世板根。其品质规范均适宜《中国药典》（2020版）的各项规定。抗坏血酸规范品（天津市科密西化学试剂有限公司），DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼，AR，合肥巴斯夫生物科技有限公司），无水乙醇，无水硫酸钠，硫酸亚铁，水杨酸，过氧化氢均为合成纯，试验用水为试验室自制蒸馏水。

1.2 仪器与配置装备部署

FA20413合终日平（上海详尽迷信仪器有限公司），WF111710-849万能破碎捣毁机（江阴市万通药化机械配置装备部署有限公司），JB挥发油测定仪（常州普天仪器制作有限公司），T6型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

2 方式与服从

2.1 白芷挥发油的含量测定

取去世板后经破碎捣毁成未必粒度的白芷粉末50.0g，置于2000mL的圆底烧瓶中，退出未必量蒸馏水，浸泡确守光阴，接管水蒸气蒸馏法提取白芷挥发油，参照2020版《中国药典》（四部2240挥发油测定法）测定挥发油的体积，记实出油量，经无水硫酸钠去世板后，置于具塞瓶中称重。依据公式合计患上油率，患上油率（%）=（M₁-M₂）/M₀×100％。其中M₁为挥发油以及具塞瓶的总品质，M₂为具塞瓶的品质，M₀为药材粉末品质。

2.2 单因素试验

水蒸气蒸馏法提取挥发油的影响因素主要有液料比、浸泡光阴、提取光阴以及破碎捣毁粒度。本试验选取以上4个因素作为单因素试验的审核因素。

液料比A判断：详尽称取过50目筛的白芷粉末50.0g，置于2000mL的圆底烧瓶中，浸泡光阴为2h、提取光阴为3h，审核区别液料比5∶1mL/g、10∶1mL/g、15∶1mL/g、20∶1mL/g、25∶1mL/g对于白芷挥发油患上率的影响。

浸泡光阴B判断：详尽称取过50目筛的白芷粉末50.0g，置于2000mL的圆底烧瓶中，液料比为15∶1mL/g，提取光阴为3h，审核区别浸泡光阴0h、1h、2h、3h、4h对于白芷挥发油患上率的影响。

提取光阴C判断：详尽称取过50目筛的白芷粉末50.0g，置于2000mL的圆底烧瓶中，液料比为15∶1mL/g，浸泡光阴为2h，审核区别提取光阴2h、3h、4h、5h、6h对于白芷挥发油患上率的影响。

破碎捣毁粒度D判断：详尽称取分说过10目、24目、50目、65目、80目筛的白芷粗粉50.0g，置于2000mL的圆底烧瓶中，液料比为15∶1mL/g，浸泡光阴为2h，提取光阴为3h，审核区别破碎捣毁粒度对于白芷挥发油患上率的影响。

2.3 Box-Behnken响应面试验妄想

在单因素试验的根基上，进一步接管BoxBehnken模子妄想试验，以液料比（A）、浸泡光阴（B）、提取光阴（C）、破碎捣毁粒度（D）四个影响因素为自变量，以白芷挥发油患上率为响应值Y，妨碍响应面合成，判断最佳提取工艺条件

BoxBehnken试验因素与水平见表1。

2.4 抗氧化活性的测定

2.4.1 DPPH从容基翦灭能耐测定

参考马延红等测定挥发油抗氧化活性的方式，并略作改动。取区别量的白芷挥发油至于50mL的容量瓶中。用无水乙醇将样品配制成0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL区别浓度的白芷挥发油样品溶液，分说取2.0mL上述样品溶液以及2.0mL浓度为0.1妹妹ol/mL的DPPH溶液置于具塞比色管中，搅浑平均后放于避光处静置30min后，用紫外分光光度法在波长517nm处测定其吸光度，重复测定三次，取平均值，记为A1；用相同体积的无水乙醇分说替换DPPH溶液以及白芷挥发油样品溶液，在相同条件下测定吸光度，分说记为A2以及A0。遵照公式合计翦灭率，并以以及样品同浓度的抗坏血酸（Vc）比力品溶液作为阴性比力。翦灭率（%）=［1-（A1-A2）/A0］×100%。

2.4.2 羟从容基翦灭能耐的测定

参考罗秋水等翦灭羟从容基的方式，略有改动。取6支试管，挨次退出2.0mL的6妹妹ol/LFeSO4溶液，分说退出浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL的白芷挥发油无水乙醇溶液1.0mL以及2.0mL的6妹妹ol/LH2O2溶液，短缺振摇后，静置10min，再挨次退出2.0mL的6妹妹ol/L的水杨酸乙醇溶液，待搅浑平均后，在50℃的水浴中反映30min，并置于波长517nm处测患上区别浓度下的白芷挥发油溶液吸光度，平行测定三次，取平均值记为Aa，用1.0mL的无水乙醇替换样品溶液测无暇白比力液吸光度A0，用1.0mL无水乙醇替换样品溶液不加显色剂H2O2测患上底物的吸光度Ab。按公式合计羟从容基翦灭率，翦灭率=［1-（Aa-Ab）/A0］×100%。以以及样品同浓度的抗坏血酸（Vc）比力品溶液作为阴性比力。

相干链接：硫酸亚铁，水杨酸，过氧化氢，无水硫酸钠

申明：本文所用图片、翰墨源头《中国食物削减剂》，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割